“AÑO DE LA INFRAESTRUCTURA PARA LA INTEGRACIÓN”

UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

CATEDRA : BIOLOGIA

CATEDRÁTICO :

PRESENTADO POR :

CICLO : I

HUANCAYO - PERU

2005

PRACTICA Nº 1

OBSERVACION Y RECONOCIMIENTO DE MATERIALES

Y EQUIPOS DE LABORATORIO

III) MATERIALES:

• Tubos de ensayo

• Pipetas volumétricas y graduadas

• Probeta graduada

• Matraz de Erlenmeyer (sin pico)

• Matraz Kitasato (con pico)

• Fiola

• Vasos de precipitación o de Beaker graduados y sin graduar

• Cápsula de porcelana

• Mortero con Pilón

• Frasco lavador

• Embudo de vidrio

• Bagueta de vidrio

• Gotero o cuenta Gotas

• Placas Petri

• Laminillas porta objetos y cubre objetos

• Otros Materiales

• Microscopio compuesto

• Pinzas metálicas y de madera

• Trípodes

• Tijeras

• Argollas

• Termómetros

• Centrífuga

• Mechero de Bunsen

• Mechero de alcohol

• Hornilla eléctrica

• Malla de asbesto

• Soporte universal

• Escobillas para tubos

• Tapones de goma horadados y sin horadar

• Estiletes o asas de Coly

• Lanceta de Franke

• Bisturí

IV) PROCEDIMIENTO:

• Materiales de Vidrio:

• Tubos de ensayo.- Llamados también tubos de prueba, son materiales bastante usados en las practicas y como su nombre lo indica sirve para realizar pruebas o ensayos, también sirve para llevar muestras de sangre, esputo(en este caso los tubos deben tener tapón de goma o tapa enrroscable), también sirve para llevar a calentamiento a la llama de mechero algunas sustancias a analizar cualitativamente o cuantitativamente utilizando ciertos reactivos, estos tubos son termo resistentes

• Pipetas.- Son tubos graduados de diferentes calibres y sirven para trasladar líquidos tales como colorantes, ácidos, sustancias alcalinas y otros, se puede usar también como cuenta gotas o para agregar en la reacción ciertas sustancias líquidas que sean en cantidades exactas para demostrar una reacción química o bioquímica.

La forma de usar es sencilla, pues se aspira el líquido con la boca con sumo cuidado para evitar ingerirlas, pues inmediatamente se debe taponar con el dedo índice, y luego se debe destacar la cantidad de la columna liquida contenida en un tubo, colocando el menisco tangencialmente en la recta de la línea graduada; igualmente se puede usar como un simple gotero, pues para ello se tapa la boca de la pipeta con el dedo índice, y luego se debe destarar la cantidad de la columna liquida contenida en el tubo, colocando el menisco tangencialmente en la recta de la línea graduada; igualmente se puede usar como un simple gotero, pues para ello se tapa la boca de la pipeta con el dedo índice luego se introduce al fondo del frasco que contenga alguna sustancia líquida a usar, finalmente se deja caer en gotas o a choro suave la muestra a analizar.

• Probetas.- Son tubos cilíndricos con base plana graduadas, sirve para medir líquidos con gran exactitud.

• Matraz de Kitasato, Erlenmeyer y Fiolas.- Son materiales que generalmente se usan para traspasar o contener líquidos, además para filtrar o apoyar los tubos de ensayo al realizar alguna experiencia ya que por su cuello largo y delgado facilita este tratamiento.

• Vaso de precipitación.- Para realizar mezclas y vaciar líquidos con facilidad por tener bocas anchas, se les llama también Beaker, unos son de boca circular y otros de boca en pico, éstos son los más recomendables porque evita se derrame los líquidos fuera de los experimentos.

• Cápsula de porcelana.- Sirve para llevar a calentamiento sustancias sólidas

• Mortero con Pilón.- Sirve para triturar o moler algunos componentes de consistencia sólida(elementos químicos).

• Frasco Lavador.- Especie de chisguete que termina en sifón, sirve para lavar tubos de ensayo y enjuagarlos usando agua destilada.

• Embudo de Vidrio.- Sirve para decantar o filtrar algunas soluciones.

• Bagueta de Vidrio.- Sirve para poder agitar o poder mezclar algunas soluciones a utilizar.

• Gotero.- Sirve para hacer cultivos en microbiologia y también para guardar muestras pequeñas.

• Laminilla porta y cubre objetos.- Sirve para realizar montajes que se desean observar en el microscopio.

• Materiales de Vidrio:

• Microscopio.- Sirve para visualizar muestras que no se observan a simple para ello hay que conocer su técnica o manejo específico

• Pinzas metálicas y de madera.- Sirve para sujetar los tubos de ensayo llevados a calentamiento antes de sujetar el tubo se debe calentar ligeramente por flameo la pinza metálica para evitar que por cambio de temperatura se quiebre el tubo.

• Trípodes.- Son soportes sobre los que muchas veces se coloca la rejilla o malla de asbesto, para llevar a calentamiento los vasos de precipitación o matraces.

• Tijeras.- Para realizar cortes de las muestras muchas veces si deseamos un corte fino usar una gillette, o una hoja de bisturí.

• Termómetro.- Sirve para poder medir las temperaturas de las soluciones que usamos.

• Centrífuga.- Para separar sustancias de diferentes densidades cuando se encuentran disueltas en un medio liquido por ejemplo para poder separar el suero del paquete globular de la sangre se centrifuaga a 3,500 r.p.m. por 5 minutos.

• Mecheros.- Para llevar a calentamiento una muestra os sustancias que lo requieren

• Hornilla Eléctrica.- Sirve para poder elevar la temperatura a sustancias que lo requieran

• Malla de Asbesto.- Sirve de asiento para recipientes de vidrio que va ha sufrir calentamiento, facilita a un calentamiento suave y uniforme.

• Soporte Universal.- Sirve para sostener posiciones fijas de diversos materiales de laboratorio específicamente cuando se arman materiales complicados entre los usos mas comunes podemos citar:

• El pie o soporte vertical: Elemento importante enroscado a una base sólida sobre el cual se arman o sujetan los otros dispositivos.

• Los aros de soporte: Son anillos en cuyo extremo tienen una tenaza que sirve para sujetar el soporte.

• Pinzas: Tenazas metálicas que sirven para sujetar los materiales de laboratorio.

• Escobillas de Tubos.- Son escobillas de forma alargada que sirven para poder limpiar el interior de los tubos de ensayo.

• Tapones de Jebe.- Sirve para poder taponar los tubos, frascos y armar algunos equipos, se llaman horadados cuando tienen foraciones:

• Monohoradado: un solo conducto

• Bihoradado: Cuñado tienen dos conductos

• Estiletes.- Se usan para extender muestras microscópicas con facilidad en la lamina porta objeto

PRACTICA Nº 2

• TEMA:

DESCRIPCION Y MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

• OBJETIVOS:

• El microscopio es un elemento óptico que nos sirve para observar elementos que no son vistos a simple vista como una extensión del sentido de la vista.

• Su cuidado debe ser estricto por que sin el no podremos observar los microorganismos

• FUNDAMENTO TEORICO

CONCEPTO

El microscopio es un elemento óptico que nos sirve para observar elementos que no son vistos a simple vista como una extensión del sentido de la vista

Existen también microscopios simples compuestos y electrónicos

PARTES DEL MICROSCOPIO

El microscopio consta de las siguientes partes:

• Parte Óptica:

Es la parte fundamental del microscopio y lo conforman el ocular, los objetivos, y los aparatos de iluminación, como el espejo, condensador, diafragma y focos.

• Oculares: Esta situado en el extremo superior del tubo óptico lo constituye dos lentes convergentes, dispuestos en los extremos del tubo se denomina ocular por que está cerca del ojo del observador.

• Objetivos: Son lentes constituidos por lentes convergentes, se encuentran en el extremo inferior cerca del objeto, cuerpo o muestra a observarse los objetivos de menor poder son de 10 X y 40 X y el de mayor poder es el de 100 X unidades de aumento. Los objetivos de menor poder son conocidos como objetivos de enfoque rápido, para inicialmente detectan la imagen del campo microscopio a observar, luego se pasa al objetivo de mayor poder (100 X) para poder observar imágenes de objetivos que previamente hayan sido inmersos en sustancias cuyo índice de refracción nos permitirá observar con nitidez

Tienen diferentes alcances:

En NIKON: Ocular 15 x

• Obj. anillo rojo = 4 x

• Obj. Anillo amarillo = 10 x

• Obj anillo celeste = 40 x

• Obj anillo blanco = 100 x

EN WILD: Ocular 10 x

• Obj = 10 x

• Obj = 40 x

• Obj = 70 x

• Obj = 100 x

• Espejo: Se halla situada por encima del pie; esta conformada por un espejo plano o normal y otro concavo su funcion es la de captar la luz necesaria para iluminar el campo microscopico.

Actualmente los microscopios compuestos llevan luz incorporada por tanto ya no se usa el espejo como sucede con los microscopios Nylon y Wild

• Condensador y diafragma: El condensador y el diafragma ademas del espejo conforman el aparato de iluminación, mediante el diafragma se controla el paso de la luz. El condensador sirve para concentrar la cantidad de luz que debe iluminar el campo optico de la superficie del portaobjetos. El diafragma sirve para permitir el paso de mayor o menor intensidad de luz que va a iluminar el acmpo optico.

En ambos casos llevan un estilete lateral que nos permite manipular ambos dispocitivos

• Parte Mecánica:

Esta parte es conocida tambien como estatico o montutra y los conforman el tubo optico, el bazo o columna, la platian, el revolver o porta objetivo en sus extremos superior o inferior respectivamente, el pie, el tornillo macrométrico y micrométrico

• Tubo Optico: Se halla en parte superior del brazo, este tubo sustenta el ocular y el porta objetivo en sus extremos superior e inferior respectivamente

• El brazo o columna: Varia de acuerdo al modelo en cuya parte superior descansa el tubo ocular.

• Platina: Es una superficie plana, metalica de forma recatangular que tiene un orificio cirular en su parte central que permite el paso de los rayos de luz, provienen del aparato de iluminación que se hallan por debajo de esta. La platina esta situada perpendicularmente al eje optico del microscopio su finalidad es sostener el porta objetos ademas en la platina se encuentra un isstema de piñones con sus respectivos tornillos y pinzas que permiten movimientos laterales del porta objetos.

• El porta objetivos: Denominado tambien revolver de forma cirular en la cual se monta los objetivos, el revolver tiene movimiento giratorio lo cual permite utilizar cualquiera de los movimientos.

• Sistema de movimiento: Denominado solamente tronillo macrométrico que consta de una cremallera, fija en la parte posterior del tubo optico y un piñon situado en una pieza única o brazo, mediante este se tiene movimientos rápidos.

• Sistema de movimiento lento: Conocido como tornillo micrometrico que esta contituido de un tornillo largo y de paso estrecho que lleva una tuerca dentada lo que permite un desplazamiento micrometrico.

• MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO

• Se saca el microscopio del estuche con sumo cuidado sujetandose del asa o del brazo.

• Cogiendo con la otra mano al pie se coloca sobre una mesa firme.

• A continuación se conecta el microscopio y con el diafragma se calcula una iluminación media

• Luego colocamos la muestra preparada sobre la platina sujetandola con los ganchos del carrito (charriot) donde se coloca la muestra a observar.

• Con el tornillo macrométrico ubicamos e iluminamos la muestra con la mayor nitidez posible procedemos a examinar la muestra detalladamente.

• Una vez examinada volvemos al sistema de objetivos hacia el menor aumento.

• Con el tornillo macrométrico levantamos el tubo quitamos la muestra y con una franela o papel filtro procedemos a limpiar el microscopio.

• Luego teniendo cuidado de no mancharlo ni mojarlo y este bien limpio procedemos a guardarlo en el estuche

• MANERA DE LEER LOS AUMENTOS

Los lentes del ocular están marcados con 5x, 10x, etc.

Igualmente los lentes del objetivo señalan el aumento de 4x, 10x, 40x hasta 100x que es el lente de inmersión.

Ejemplo:

Ocular de 10x con objetivo de 40x = 400 de aumento

PRACTICA Nº 3

• TEMA A:

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA GLUCOSA MEDIANTE LA REACCION DE FEHLING

• OBJETIVOS:

• Realizar el análisis cualitativo químicamente de la glucosa

• La glucosa al oxidarse reduce los iones cúprico que pasan a ser iones cuprosos cuando se utilizan el Fh-A y Fh-B

• MATERIALES:

• Glucosa en polvo

• Reactivo de Fh-A

• Reactivo de Fh-B

• Tubo de ensayo 1.5 x 15 cm

• Gradilla metálica

• Pipetas de 10 ml graduado

• Pinza de madera

• Agua destilada

• Vaso de precipitación

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de glucosa:

• Diluir 5 grs. De glucosa en 100 cc. De agua destilada. (Para trabajo 1.0 grs en 20 cc de agua destilada)

• Solución de Reactivos:

• Fehling-A:

• CuSO4 cristalizado 64.64 grs

• Agua destilada 500 cc

• Fehling-B:

• Tartrato sódico potásico 17.5 gr

• KOH 77 gr

• H2O ( Agua Destilada) 500 cc

• PROCEDIMIENTO:

• Mezclar en partes iguales las soluciones de Fh-A y Fh-B 3 a 4 gotas

• Añadir 2 cc de solución de glucosa

• Tanto los reactivos como la solución de glucosa se debe colocar en un tubo de prueba y luego homogenizar agitando el tubo de ensayo.

• Luego someter a la accion de la llama de un mechero de alcohol o de ron de quemar, tomando el tubo con una pinza de madera.

• CONCLUSIONES:

• Todos los monosacáridos en solución fuertemente alcalina son reductores muy enérgicos, ya que cuando se encuentran con pH muy alto, experimentan ionización, estas formas de enedioles son muy reactivas y se oxidan fácimente. Como consecuencia de ello, y en el presente experimento reducen fácilmente los iones Cu ++ (Cúprico) a Cu + (Cuproso)

• En la reacción de Fehling, el reactivo Fh-A proporciona los iones Cu ++ que van a ser reducidos. El reactivo Fh-B, formado por tartrato sódico - potásico proporciona la alcalinidad necesaria para que este proceso se realice.

• Cuando se calienta un azúcar con uno de los reactivos de Cu alcalino ocurre el siguiente proceso:

Azúcar + álcali enedioles

(Reductores del complejo cúprico-tartrato)

+

Cu ++

Cu2O CuOH HO- + Cu+ (mezcla de ácidos-azúcares)

• La glucosa se oxida y reduce los iones cúpricos que pasan a cuprosos, combinándose a su vez con iones hidroxilo, formando hidróxido cuproso (amarillo), que por el calor se convierte en óxido cuproso (rojo).

C6H12O6 + Fh-A + Fh-B 2Cu2O CuOH

• La glucosa al oxidarse forma mezclas complejas de ácidos (azúcares-ácidos):

• Adónicos

• Aldáricos

• Uronicos

• En conclusión la glucosa se oxida y reduce los iones cúpricos que pasan a cuprosos, combinándose a su vez con los iones hidroxilo HO- , formando 2CuOH hidróxido cuproso (amarillo patito), que por el calor se convierte en oxido cuproso Cu2O (rojo ladrillo).

Anexo

• TEMA B:

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA GLUCOSA PRESENTE EN LA ORINA MEDIANTE LA REACCION DE BENEDICT

• OBJETIVOS:

• Al someter la orina a la acción de Benedict se va a demostrar cualitativamente el viraje de la muestra

• MATERIALES:

• Muestra de orina de diabético

• Reactivo de Fh-A

• Reactivo de Fh-B

• Tubo de ensayo 1.5 x 15 cm

• Gradilla metálica

• Pipetas de 10 ml graduado

• Pinza de madera

• Agua destilada

• Vaso de precipitación

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de Reactivos:

• Benedict:

• CuSO4 cristalizado 1.73 gr

• Citrato sódico 17.3 gr

• Carbonato sódico anhídrido 10.0 gr

• Agua destilada 100 cc

• PROCEDIMIENTO:

• Añadir 3 cc. De reactivo de Benedict a 3 cc de solución de glucosa.

• Si se experimenta en un tubo de prueba se debe añadir de 3 a 4 gotas de reactivo de Benedict en 1 cc de solución de orina.

• Hervir durante 2 a 3 minutos a la llama del mechero.

• Se formara un pequeño precipitado amarillo como positividad

• CONCLUSIONES:

• El fundamento de la acción de Benedict para analizar prácticamente es el mismo que el de Fehling solo que se utiliza áscaris más suaves como es el Carbonato Sódico Amino.

• Sometida la solución de la glucosa mas el Benedict a la llama de un mechero vira a color amarillo que nos indica positividad, en cambio no llega a virar a color rojo por que no se forma oxido cuproso:

C6H12O6 + Benedict CuOH

Amarillo

(Hidróxido Cuproso)

• Esta relación se utiliza para averiguar la presencia de glucosa en la orina pues se muestra color amarillo y no se forma oxido cuproso, porque en la muestra de orina se encuentra el amoniaco y la creatina compuestos que disuelven al oxido cuproso.

PRACTICA Nº 4

• TEMA A:

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA SACAROSA

• OBJETIVOS:

• Analizar cualitativamente si la solución se sacarosa es reductora o no reductora

• MATERIALES:

• 5 gr de sacarosa

• Reactivo de Fh-A

• Reactivo de Fh-B

• Tubo de ensayo 1.5 x 15 cm.

• Gradilla metálica

• Pipetas de 10 ml graduado

• Pinza de madera

• Agua destilada

• 2 Vasos de precipitación

• 1 Pizeta

• Mechero de Ron

• 1 Probeta de 10 ml

• 1 Bagueta de vidrio

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de sacarosa:

• Diluir 5 grs. de Sacarosa en 100 cc. De agua destilada. (Para trabajo 1.0 grs en 20 cc de agua destilada)

• Solución de Reactivos:

• Fehling-A:

• CuSO4 cristalizado 64.64 grs

• Agua destilada 500 cc

• Fehling-B:

• Tartrato sódico potásico 17.5 gr

• KOH 77 gr

• H2O ( Agua Destilada) 500 cc

• PROCEDIMIENTO:

• En un vaso de precipitado preparar la solución de sacarosa

• Separar en un tubo de ensayo 2 cc de la solución de Sacarosa

• Agregar 2 gotas de Fh-A y 2 gotas de Fh-B

• Luego homogenizar agitando el tubo de ensayo.

• Luego someter a la acción de la llama de un mechero de alcohol o de ron de quemar, tomando el tubo con una pinza de madera.

• Al final no aparece ningún precipitado rojo entonces el resultado es negativo

• CONCLUSIONES:

• No tiene poder reductor por lo tanto los iones Cu ++ (Cúprico) que provienen del sulfato de cobre no ha sido reducido

CuSO4 (Fh-A)

Iones Cu ++ Cu + Permanece

Ico Oso Azul

• Las moléculas simples (glucosa + fructosa) se realiza en el carbono 1 de la glucosa y el carbono 2 de la fructuosa.

• La falta del poder reductor de la sacarosa se debe a la ausencia de carbono anomérico libre puesto que ambas moléculas simples se hayan unidas entre si.

PRACTICA Nº 4

• TEMA B:

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA LACTOSA

• OBJETIVOS:

• Analizar cualitativamente si la solución se lactosa es reductora o no reductora

• MATERIALES:

• 5 gr de lactosa

• Reactivo de Fh-A

• Reactivo de Fh-B

• Tubo de ensayo 1.5 x 15 cm.

• Gradilla metálica

• Pipetas de 10 ml graduado

• Pinza de madera

• Agua destilada

• 2 Vasos de precipitación

• 1 Pizeta

• 1 Mechero de Ron

• 1 Probeta de 10 ml

• 1 Bagueta de vidrio

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de lactosa:

• Diluir 5 grs. de Lactosa en 100 cc. De agua destilada.

• Solución de Reactivos:

• Fehling-A:

• CuSO4 cristalizado 64.64 grs

• Agua destilada 500 cc

• Fehling-B:

• Tartrato sódico potásico 17.5 gr

• KOH 77 gr

• H2O ( Agua Destilada) 500 cc

• PROCEDIMIENTO:

• En un vaso de precipitado preparar la solución de Lactosa.

• Separar en un tubo de ensayo 2 cc de la solución de Lactosa

• Agregar 2 gotas de Fh-A y 2 gotas de Fh-B

• Luego homogenizar agitando el tubo de ensayo.

• Luego someter a la acción de la llama de un mechero de alcohol o de ron de quemar, tomando el tubo con una pinza de madera.

• Se va a observar un precipitado rojo como positividad

• CONCLUSIONES:

• La lactosa es reductora por cuanto la molécula simple que es la mucosa tiene el poder reductor.

• Pues lo iones cúprico de sulfato de cobre han sido reducidos a cuprosos, es decir al poder reductor de la lactosa se oxida para formar el ácido lacto biónico

• Los componentes simples (glucosa + galactosa) van unidos por un enlace -1,4

PRACTICA Nº 4

• TEMA C:

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA MALTOSA

• OBJETIVOS:

• Analizar cualitativamente si la solución se maltosa es reductora o no reductora

• MATERIALES:

• 5 gr de maltosa

• Reactivo de Fh-A

• Reactivo de Fh-B

• Tubo de ensayo 1.5 x 15 cm.

• Gradilla metálica

• Pipetas de 10 ml graduado

• Pinza de madera

• Agua destilada

• 2 Vasos de precipitación

• 1 Pizeta

• 1 Mechero de Ron

• 1 Probeta de 10 ml

• 1 Bagueta de vidrio

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de lactosa:

• Diluir 5 grs. de maltosa en 100 cc. De agua destilada.

• Solución de Reactivos:

• Fehling-A:

• CuSO4 cristalizado 64.64 grs

• Agua destilada 500 cc

• Fehling-B:

• Tartrato sódico potásico 17.5 gr

• KOH 77 gr

• H2O ( Agua Destilada) 500 cc

• PROCEDIMIENTO:

• En un vaso de precipitado preparar la solución de Maltosa.

• Separar en un tubo de ensayo 2 cc de la solución de Maltosa

• Agregar 2 gotas de Fh-A y 2 gotas de Fh-B

• Luego homogenizar agitando el tubo de ensayo.

• Luego someter a la acción de la llama de un mechero de alcohol o de ron de quemar, tomando el tubo con una pinza de madera.

• Se va a observar un precipitado rojo como positividad

• CONCLUSIONES:

• Tiene poder reductor porque al oxidarse reduce a los iones cúprico procedente del CuSO4 a iones cuproso.

Anexo

• TEMA :

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DE LA LACTOSA POR REACCION DEL ÁCIDO NITRICO

• OBJETIVOS:

• Vamos a averiguar si la lactosa hemiacetal es reductora o no.

• Si es oxidable o no frente al ácido nítrico.

• MATERIALES:

• Solución de lactosa a experimentar.

• Ácido nítrico concentrado

• Cápsula de vidrio pirex

• Mechero de alcohol o de Ron de quemar

• Pipetas de 10 ml

• Pinzas de madera

• Agua destilada

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de lactosa:

• Diluir 5 grs. de Lactosa en 100 cc. De agua destilada.

• Ácido nítrico concentrado:

• Ácido nítrico químicamente puro: 75 cc

• Agua destilada: 25 cc

• PROCEDIMIENTO:

• Colocar 15 cc de solución de la lactosa en una cápsula de vidrio (previamente calentada)

• Agregar 8 cc de ácido nítrico concentrado

• Mezclar con la baqueta (Homogenizar)

• Dejar evaporar lentamente

• Después de un tiempo aparece un precipitado blanco como positividad.

• CONCLUSIONES:

• La lactosa, como hemiacetal es reductora y por lo tanto fácilmente oxidable, en esta reacción característica del ácido nítrico, los cristales blancos que aparecen corresponden al ácido músico, resultado de la oxidación de la lactosa.

PRACTICA Nº 5

• TEMA :

RECONOCIMIENTO CUALITATIVO DEL ALMIDON POR LA REACCION DEL LUGOL DEBIL

• OBJETIVOS:

• Vamos a investigar el viraje de solución blanco a un color azul brilloso al agregarle lugol débil 2 - 3 gotas

• Investigar a que se debe el viraje

• MATERIALES:

• Almidón

• Agua destilada

• Gradilla metálica

• 1 Mechero de Ron

• 1 Pizeta con agua

• Pinza de madera

• Vaso de precipitación

• Una pipeta 10 ml ó gotero

• Tubo de ensayo

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de almidón:

• Diluir de 2.5 a 5 grs. de de almidón en 20 ml de agua destilada fría

• Lugol: solución stock:

• Yodo en cristales: 5 gr

• Yoduro de potasio: 10 gr

• Agua destilada: 100 ml

• Para el trabajo usaremos 1 ml de la solución stock en 5 ml de agua destilada

• PROCEDIMIENTO:

• Colocar unos 5 ml de la solución de almidón que esta contenida en el vaso de precipitación.

• Colocar de 2 a 3 gotas de lugol débil

• Se observara el viraje del color blanco de la solución a un color azul violáceo brillante.

• Someter a la llama del mechero con una pinza de madera.

• Aquí se observara que el color azul violáceo brillante se pierde y cambiara a blanco

• Finalmente sometemos al chorro del grifo a chorro lento y se observara que vuelve a tomar el color azul violáceo brillante

• CONCLUSIONES:

• La solución de almidón vira a un color azul violáceo brillante debido a sus dos componentes moleculares químicos que son del  amilosa y la amilo pectina cuya reacción es:

 - amilosa + lugol Azul Azul violáceo

amilopectina + lugol Rojo Violáceo Brillante

• Los núcleos del almidón es solución acuosa tienen la propiedad de captar a las moléculas del lugol débil por tanto da ese viraje.

• Cuando se somete a la acción del calor a la llama del mechero, el color azul vira a blanco y cuando se somete a enfriamiento mediante el agua a chorro muerto regresa a virar a color azul violáceo.

PRACTICA Nº 6

• TEMA :

RECONOCIMIENTO DE LAS PROTEINAS POR LA REACCION BIURET

• OBJETIVOS:

• Determinar cualitativamente la presencia de proteínas en sustancias orgánicas y biológicas

• MATERIALES:

• Clara de huevo

• Leche

• 1 Pizeta con agua

• Gradilla metálica

• Baguetas de vidrio

• Tubo de prueba

• Mechero de Ron

• Pinza de madera

• Pipetas 10 ml

• Vaso de precipitación 250 ml

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Solución de Ovoalbúmina:

• 2 cc de clara de huevo

• 20 ml de agua destilada

• Sino (agua / clara de huevo) = 5/1

• Solución de lactoalbúmina:

• 3 a 5 cc leche en 20 ml de agua destilada

• PROCEDIMIENTO:

• De las soluciones preparadas separamos de 3 a 5 cc en un tubo de prueba

• Añadir de 2 a 3 gotas del reactivo de biuret

• Añadir de una a dos gotas de Na(OH) al 20 %

• Homogenizar la muestra

• Dará como resultado positivo una coloración violeta

• En el experimento que se realiza la gama de colores varia de violeta púrpura a violeta rosado o rosado depende del material biológico con el que se trabaja.

• CONCLUSIONES:

• La reacciona del biuret se debe a la combinación de los iones cúprico con los pares de electrones sin compartir del nitrógeno del péptido y del oxigeno del agua, con formación de un complejo coloreado

• El biuret es un cuerpo muy simple puede originarse con dos moléculas de Urea con desprendimiento de amoniaco

• Si luego se calienta Urea a 80º C se descompone la molécula y forma un biuret

• Si luego se trata a continuación el biuret fuertemente alcalino con una solución de sulfato cúprico (CuSO4) al 10 % se obtiene un color violeta intenso

• Este tipo de análisis cualitativo es necesario para el reconocimiento de albúmina patológica en una muestra de orina y para investigar cualitativamente presencia de proteínas en el suero de la sangre

PRACTICA Nº 6 (Anexo)

• TEMA :

SAPONIFICACION DE LAS GRASAS Y ACEITES

• OBJETIVOS:

• Descubrir la hidrólisis alcalina de los esteres

• La hidrólisis conduce a la formación de sales y ácidos grasos con el nombre de jabones: NaOH Jabones sólidos, KOH Jabones líquidos

• En los organismos vivos la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la reacción de enzimas fermentos (lipasa) y se obtiene los ácidos grasos y glicéridos.

• CONCLUSIONES:

PRACTICA Nº 7

• TEMA :

DIFERENCIA DE ESPECIES

• OBJETIVOS:

• Diferenciar las especies del Reino Monera con los Fungís

• MATERIALES:

• Bacterias

• Hongos de plantas: Levaduras, Mohos

• Microscopio

• La mina porta Objeto

• Cubre objetos

• Gradilla metálica

• Rollo de papel higiénico

• Pizeta de Agua

• Pinza metálica

• Asa de Koly

• Estilete metálico

• Mechero de Ron

• Fósforo

• Cepillos

• Solución de violeta genciana

• Solución de lugol débil

• Alcohol acetona

• Safranina

• PREPARACIÓN DE REACTIVOS

• Batería Gram.

• Solución de violeta genciana

• Solución de lugol débil

• Alcohol acetona

• Safranina

• PROCEDIMIENTO:

• Coloración Gram.

• Extensión:

• Tomar la muestra (esputo, heces, Mucus, Secreción vaginal)

• Extender la muestra en el porta objeto utilizando el asa de Koli o el estilete previamente esterilizado

• Fijación

• Una vez extendida la muestra sobre el porta objeto se fijan las bacterias flameando a la llama del mechero o simplemente a la Tº ambiental

• Tinción o Coloración: Consiste en teñir a las bacterias en:

• Agregar varias gotas de la solución de violeta de genciana durante 3 minutos

• Lavar con agua de pila a chorro muerto

• Agregar solución de lugol débil durante 1 minuto

• Decolorar, volcar el lugol y lavar la lamina con alcohol acetona hasta que el liquido caiga limpio

• Lavar con agua de pila a chorro muerto

• Añadir solución de Safranina que actúa como coloración de contraste durante 2 minutos

• Lavar con agua de pila

• Dejar secar a la llama del mechero ó a temperatura ambiente

• Observar al microscopio 5x - 100x (inmersión con aceite)

• CONCLUSIONES:

INFORMES DE LABORATORIO