A PARTIR DE UNA DISOLUCIÓN DE AZUL DE METILENO AL 1% PESO-VOLUMEN REALIZAR UNA DILUCIÓN EN LA QUE EL FACTOR DE DILUCIÓN (FD) DEL 1er. TUBO SEA 1 / 4 Y ENTRE TUBO Y TUBO 1 / 3.
¿Cuántos ml de diluyente y dilución hay en cada tubo?
¿Cuál es el factor de dilución del 4º tubo?
¿Cuántos mg/ml hay en el 4º tubo?
MATERIAL DE LABORATORIO
Tubos de ensayo (4) de 10 x 100 mm.
Tubo de ensayo (1) de 18 x 180 mm.
Gradilla. (1)
Pipeta de 2 ml. (1)
Propipeta de goma o de émbolo. (1)
Vasos de precipitado (2).
Papel filtro y parafilm.
Reactivo: Azul de Metileno al 1%.
Diluyente: Agua destilada.
ESQUEMA Y CÁLCULOS DEL PROBLEMA
1 / 4 1 / 12 1 / 36 1 / 108
1 2 3 4
a)
Agua 2'25 ml 2 ml 2 ml 2 ml
Azul met. 0'75ml 1 ml 1 ml 1 ml
VOLUMEN DEL 1er TUBO = 3 ml
3 ml x 1 / 4 = 0'75 ml de azul de metileno.
3 ml x 3 / 4 = 2'25 ml de agua destilada.
b) FD del 4º tubo
1 / 4 x 1 / 3 = 1 /12 1 / 12 x 1 / 3 = 1 / 36
1 / 36 x 1 / 3 = 1 / 108
mg/ml en el 4º tubo:
Concentración final (Cf) = Concentración inicial (Ci) x Factor de dilución (FD)
Cf = 1 x 1/108; Cf = 9'259 x 10-3 %
9'259 x 10-3 / 100 ml x 103 mg / 1 g = 9'259 mg / 100 ml = 9'259 x 10-2 mg/ml
PROCEDIMIENTO
Rotular el material a utilizar:
Tubos de ensayo de 10x100 mm, hay que indicar: - Nombre del compuesto.
Nº de tubo.
Factor de dilución de cada tubo.
Concentración (si se conoce).
Vasos de precipitado: - Nombre del compuesto.
Concentración.
Realizar los cálculos, teniendo en cuenta que el volumen final de cada tubo es el mismo, excepto en el último tubo.
Dispensar con la misma pipeta el volumen de diluyente en todos los tubos.
Tomamos la cantidad necesaria de disolución inicial con una pipeta, la introducimos en el 1er tubo y lo enjuagamos con diluyente aspirando y expulsando 2 o 3 veces. Esperamos a que se vacíe la punta con ésta apoyada en las paredes del tubo.
Tapamos con parafilm.
Homogeneizar suavemente.
Con la misma pipeta, tomamos la cantidad necesaria del primer tubo (1ml) y trasvasamos al 2º tubo, enjuagando, homogeneizando y repetiremos la operación del 2º al 3º tubo y del 3º al 4º tubo.
Limpieza de material.
Secado de material.
Guardado de material.
PRECAUCIONES ESPECIALES
Utilizar en todo momento el equipo de protección individual (guantes, bata, etc.)
El azul de metileno se vierte desde el envase original a un vaso de precipitado para trabajar con él. Asimismo este compuesto aún siendo de un 1% su concentración, mancha con facilidad aquel sitio lugar o cosa sobre donde se derrame.
3 ml x 1 / 3 = 1 ml de dilución que hay que trasvasar de tubo a tubo.