12. Fósforo total. 29-01-2003

Concepto:

Transformación de los compuestos fosforados en ortofosfatos y posterior valoración espectofotométrica como fosfomolibvanadato.

Material:

• Espectofotómetro que permita lecturas de a 400nm.

• Baño de arena.

Reactivos:

• Agua destilada.

• Disolución de molibdato amónico.

• Solución de metavanadato amónico.

• Acido sulfúrico conc.

• Solución patrón de fosfato.

• Muestra de zumo “Juver”.

Procedimiento:

1. Disolver las cenizas del en 5ml HCl y 2ml HNO3. Hervir durante 15 min. en baño de arena. Enrasar a un matraz de 50ml. Hacer ensayo en blanco.

2. Desarrollo del color: Tomar 5ml de las soluciones obtenidas en el matraz aforado de 50ml. Llevar hasta 10ml con agua destilada (con probeta). Añadir 10ml de reactivo metamolibdovanadato, y enrasar a 50ml con agua destilada. Después de 30min. Leer la absorbancia a 400nm. (~ 0,406)

3. Curva patrón: Diluir 10ml de solución patrón de fosfato en 250ml de agua destilada (1ml de esta disolución contiene 40µg/ml (con un contenido de 0, 80, 120, 160, 200 y 400 µg). Leer absorbancias a 400nm y trazar curva de calibrado.

Cálculos:

mg de P/100ml = A/V = 219,7129736 / 25 = 8,79 mg/100ml

A = µg de P leidos en la curva patrón. (~ 219,7129736 µg)

V = Volumen de la muestra en ml. (~ 25 ml)

Curva de calibrado ( y = 0,001742x + 0,02326 )

Interpretación de resultados:

El resultado obtenido es bastante coherente, muy cercano a 10,2 mg/100ml, que es la media de fósforo en zumos envasados.

6. Azucares. 30-01-2003

Concepto:

Eliminación previa de todas las materias reductoras distintas de los azucares, por defecación y posterior valoración basada en la acción reductora de los azucares sobre una solución cupro-alcalina. Para la determinación de azucares no reductores es necesario proceder a una hidrólisis previa.

Material:

• Material de uso normal para volumetrías.

• Baño de agua.

• Erlenmeyer de 300ml con refrigerante de reflujo.

Reactivos:

- Muestra de zumo “Juver”.

• Solución de ac. sulfúrico del 25% (6N); 0,5l.

• Solución de HCL conc.; 100ml.

• Solución de KOH 30%; 30g en 100ml.

• Solución de 0,5%.

• Solución de KI; 60g en 200ml.

• Solución de almidón; 0,5g en 50ml.

• Solución Carrez I y II.

• Solución Luff-Schoorl: Disolver 25g de ac. citrico C6H8O7 . H2O en 250ml y 71,85g de Na2CO3 en 175ml de agua tibia, cuando se haya enfriado, mezclar con cuidado ambas soluciones.

Disolver 12,5ml de CuSO4 . 5 H2O en 50ml de agua. Añadir a la disolución anterior y enrasar con agua hasta 0,5l.

• Solución de tiosulfato de sodio (Na2S2O3 . 5 H2O) 0,1N (24,8 g/l). (f = 1,243)

• Solución de fenolftaleina.

Procedimiento:

Preparación de la muestra: Se toman 5ml de muestra de zumo, se diluye con un poco de agua destilada. Se añaden 5ml de solución Carrez I y 5ml de solución Carrez II. Mezclar y enrasar hasta 250ml con agua. Dejar reposar y filtrar.

Determinación de azucares antes de la inversión. Azucares reductores: Tomar 25ml de la muestra filtrada, en un matraz (de refrigerante de reflujo) con 25ml de solución Luff-Schoorl. Añadir unas perlas de vidrio y conectar el refrigerante de reflujo. Calentar el matraz con manta eléctrica especial para matraces redondos, hasta alcanzar en dos minutos la ebullición y mantener esta durante diez minutos exactamente. Enfriar con agua, y cuando el matraz este frío añadir con 10ml de KI, y 25ml de H2SO4 y 2ml de almidón. Valorar con tiosulfato de sodio hasta viraje del indicador.

Realizar paralelamente un ensayo en blanco.

D1 = numero de ml de tiosulfato de sodio 0,1N empleados en la valoración del blanco. (= 22,8ml) x 1,243 = 28,3404 ml.

D2 = numero de ml de tiosulfato de sodio 0,1N empleados en la valoración de la muestra. (= 10,4ml) x 1,243 = 12,9272 ml.

Azucares reductores: En matraz de 100ml mezclar 50ml de filtrado de azucares con 5ml HCl y llevar el matraz al baño de agua a 70°C, donde la muestra adquirirá 67°C en 2 o 3 minutos. Enfriar a unos 20°C y neutralizar con KOH. Enrasar a 100ml con agua y hacer lo de Azucares reductores. Realizar un ensayo en blanco.

D3 = numero de ml de tiosulfato de sodio 0,1N empleados en la valoración del blanco. (= 22,9ml) x 1,243 = 28,4647 ml.

D4 = numero de ml de tiosulfato de sodio 0,1N empleados en la valoración de la muestra. (= 14,4ml) x 1,243 = 17,8992 ml.

Cálculos:

Con los valores D5 y D6 y de la tabla I se obtienen los contenidos en mg de glucosa (A) y (B).

D5 = D1 - D2 = 15,4 ml ; de la tabla I se obtiene el valor de (A = 39,6).

D6 = D3 - D4 = 10,5 ml ; de la tabla I se obtiene el valor de (B = 26,3).

Azucares reductores g de glucosa/100ml = A/V = 31,38/5 = 7,92 g/100ml

Azucares totales g de glucosa/100ml = 2 . B/V = 2. 21,1/5 = 10,5 g/100ml

Interpretación de resultados:

Los resultados obtenidos se exceden quizá, un poco de los valores habituales de azucares en zumos envasados.