Muestras de la Nariz, Faringe, Nasofaringe y Oído

Bacteriología. TSB. Tinción de Gram. Solución de Lugol. Microorganismos

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INTRODUCCIÓN

Toma de muestra

Para la muestra de nariz, faringe y nasofaringe

Coger 2 hisopos impregnados en un caldo (TSB) y tocar el fondo de la garganta, amígdalas y lugares con inflamación, exudado o ulceración. No tocar labios ni lengua. Un hisopo se utiliza para el examen microscópico (tinción de Gram) y el otro para el cultivo microbiológico: agar sangre, agar chocolate, etc.

Para la muestra de oído

Las muestras se toman también con un hisopo previamente impregnado en caldo (TSB).

Hay que tener en cuenta que no son zonas estériles, y que por tanto en ellas hay biota saprófita. Por ello, se deben procesar las muestras inmediatamente, pero si no es posible, se puede usar un medio de transporte como Stuary (no es aconsejable guardar en la nevera).

" Particularidades en la toma de la muestra

  • Si se trata de Haemophilus, Bordetella o Neisseria meningitidis, que pueden tener alta abundancia en nasofaringe, la toma de muestra se hace con escobillones flexibles, introduciéndolos por la nariz hasta la faringe posterior, o bien por la boca hasta detrás de la úvula.

  • Para los portadores de Staphylococcus y Streptococcus se suelen emplear frotis de la parte anterior de la nariz.

  • Realización de la práctica

    Vamos a tomar muestra de nariz, faringe y oído. A continuación haremos una tinción de Gram y finalmente realizaremos la identificación de los microorganismos observados al microscopio.

    Tinción de Gram (solución cristal-violeta)

    Solución A:

    - Cristal violeta 2 g

    - Alcohol etílico 30 ml

    SOLUCIÓN B:

    - Oxalato de amonio 0.8 g

    - Agua oxigenada 20 ml

    Se diluye la solución A al 10% en agua destilada y se mezcla con igual volumen de la solución B.

    Solución de Lugol:

    - Yodo 1 g

    - Yoduro de potasio 2 g

    - Agua destilada 20 ml

    Decolorante:

    - Alcohol etílico de 95°

    Contraste:

    - Fucsina básica 0.10 g

    - Agua destilada 100 ml

    Técnica

  • Preparar el frotis y fijarlo al calor.

  • Colorear la preparación fijada, con la solución de cristal violeta durante un minuto.

  • Lavar con solución yodada (lugol).

  • Cubrir el frotis con lugol durante un minuto.

  • Escurrir y decolorar con alcohol hasta que no arrastre más cristal violeta.

  • Lavar con agua.

  • Contrastar con solución de fucsina durante un minuto.

  • Lavar con agua, secar al aire y examinar con objetivo de inmersión.

  • Resultados esperados

    La biota saprófita que esperamos encontrar en las muestras de nariz, faringe, nasofaringe y oído es la siguiente:

    Nariz

    • Staphylococcus epidermis

    • Staphylococcus aureus

    • Branhamella catarrhalis

    • Streptococcus pneumoniae

    Boca y faringe

    • Streptococcus (no del grupo A)

    • Lactobacillus

    • Branhamella catarrhalis

    • Neisseria, especies no patógenas

    • Staphylococcus epidermis

    • Micrococcus

    • Veillonella (cocos gramnegativos anaerobios)

    • Bacteroides sp., Fusobacterium

    • Espiroquétidos

    • Haemophilus influenzae

    • Difteroides

    • Streptococcus pneumoniae

    • Candida albicans

    • Bacilos gramnegativos (E.coli, Klebsiella, etc.)

    • Haemophilus sp.

    • Enterococos

    • Staphylococcus aureus

    • Neisseria meningitidis (meningococo)

    • Streptococcus pyogenes

    Oído externo

    - Flora de la piel (Streptococcus pneumoniae)

    - Pseudomonas aeruginosa

    - Stahylococcus epidermis

    Resultados obtenidos

    Debido a que no podemos observar ningún microorganismo en nuestra muestra vemos la de uno de nuestros compañeros en el que se aprecia claramente la presencia de Staphylococcus aureus y microorganismos característicos de dicha flora.