Glucosa

Método Benedict. Reducción de iones metálicos. Concentración de glucosa. Diagnóstico de diabetes. Análisis químico de laboratorio

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1. Hem determinat la glucosa en una mostra d'orina rebuda en el laboratori, mijançant dues tècniques: a) mètode de Benedict, b)mètode de la glucosa-oxidasa. Els resultats obtinguts han sigüt: a)200 mg/dl. b) 150 mg/dl. A què poden deure´s aquests resultats?

- a) 200 mg/dl : El método de Benedict es un test de reducción que se basa en la reducción de algunos iones metálicos por la glucosa. La reducción de los iones metálicos como el Cu++ no es especifica de la glucosa, la reacción puede ser originada por cualquier sustancia reductora presente en orina (creatinina, ácido úrico, ácido ascórbico y otros azucares reductores). La no especificidad del test del cobre puede dar falsos positivos.

Como el valor esta por encima de 160mg/dl (umbral renal) se trata de una glucosuria

( cantidad detectable de melituria(presencia de azúcar en orina: gluc, galact, fruct)en orina).En este caso se puede dar por tres motivos:

Glucosuria renal o normoglucemia: Aumento de glucosa en orina pero los valores en sangre son normales, ya que la reabsorción tubular de la glucosa es menor de lo normal = glucosa en orina. Aparece normalmente después de una comida copiosa o en caso de estrés emocional, a veces en embarazo.

Diabetes mellitus: El aumento de glucosa en orina esta relacionado con un aumento de glucosa en sangre (poliuria acompañada de polidipsia)= orina clara con elevada densidad debido a los sólidos disueltos.

Alteraciones hormonales

-b) 150mg/dl:Glucosa oxidasa (método enzimático completamente automatizado)

Glucosa gluc-oxidasa Ac glucónico + H2O2

2H2O2 peroxidasa 2H2O + O2

El oxigeno liberado oxida una sustancia que en forma oxidada presenta color. Si a la misma reacción le añadimos un cromógeno en su forma reducida (incoloro) pasará a su forma oxidada (coloreada).

la reacción quedará: Glucosa gluc-oxidasa Ac glucónico + H2O2

H2O + fenol + cromógeno peroxidasa 2H2O + quinosa coloreada

El derivado quinónico coloreado puede medirse en el espectrofotómetro ( método de Trinder); la intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de glucosa en la muestra.

2. Quines determinacions faries en un pacient diabètic que arriba al laboratori per a controlar-se. Perque?

Determinación de fructosaminas: porque si medimos la concentración de glucosa en un día no podemos saber si el paciente a seguido la dieta como tocaba o lo ha hecho solo los dos últimos días, por eso buscamos fructosaminas (cetoaminas) que son proteínas pragmáticas a las que se une la glucosa irreversiblemente; por lo tanto si la concentración de la glucosa aumenta, aumentan las fructosaminas.

Las fructosaminas tienen una vida media de 30 días, así que podemos controlar la glucosa en el plasma del individuo en las últimas 3 semanas.

Determinación de la hemoglobina glicosilada (HbA1c): dentro del eritrocito hay muchos tipos de Hb, la más abundante (90%) es la HbA0 que es la mayoritariamente glicosilada. Una vez la glucosa entra, se une por mecanismos no enzimáticos a las Hb formando glucohemoglobinas (Hb unidas a azúcares por enlaces covalentes) en cantidad proporcional al de glucosa celular.

Glucosa + HbA Base de Schiff inestable HbA1c (glicosilada)

La HbA1c es la fracción principal de la glucohemoglobinas que se divide en subfracciones (A1a + A1b + A1c + A1d). A1c es la predominante y la mejor caracterizada.

La vida media de un eritrocito es de 120 días, por tanto el nivel de Hb glicosilada estará en relación con la glucemia plasmática de 1-2 meses antes, y esto nos sirve para controlar la glucemia a largo plazo.

3. Quines determinacions faries a un pacient per a diagnosticar la diabetes. Perquè?

Niveles normales de glucosa en sangre: de 50 a 200 mg/dl (después de comer)

Determinación de la glucosa basal: concentración de la glucosa en sangre tras 8 horas en ayunas; resultados:

[glc] < 110 mg/dl = normal el individuo metaboliza bien la glucosa

[glc]> 140 mg/dl = Diabetes el individuo no puede metabolizar la glucosa.

[glc] entre 110 y 140 mg/dl =dudoso Diabetes dudosa.

4. A un pacient li ha sol·licitat una determinació d'hemoglobina glicosilada per averiguar si te diabetes. Es correcta aquesta petició?Perque?

No, ya que esta técnica es para controlar los niveles de glucosa en sangre en individuos diabéticos ya diagnosticados.

5. volem saber les proteïnes que excreta un pacient diabètic. A) quin parametre o parametres utilitzaries?Perque? b) de quins apareéis necesites disposar?

Microalbuminuria

Porque detecta la presencia de albumina ( es la proteína mas pequeña que tenemos).

Se determina por métodos inmunoquímicos: formación de complejos Ag-Ac que posteriormente se miden por nefelometría o turbidimetría.

Nefelómetro: permite medir la turbidez de un líquido o efectuar el recuento bacteriano de una suspensión.

Turbidímetro: instrumento para medir el enturbimiento de un líquido.

6. Un pacient arriba al laboratori a que se li realitze un TTGO. Li fem en primer lloc una determinació de glucèmia basal, i obtenim un resultat de 200 ml/dl. Aplicant els criteris estudiats en aquest tema, que hauríem de fer? Perquè?

No hacerle la TTGO porque si ha venido en ayunas (que es lo correcto para realizar una glucemia basal y una TTGO) y tiene 200 mg/dl; es diabético.

7. A les 5 de la vesprada arriba una mostra de sang al laboratori extreta a les 8 del matí, per determinar la glucosa, i que s'havia deixat oblidada al cim de la taula des de aleshores. Què hem de fer? Perquè?

Desechar esa muestra, pues no vale porque al no haber sido refrigerada ha perdido glucosa plasmática al estar a temperatura ambiente.

8. Quan ja tenim feta l'extracció de sang dels nostres pacients es trenca l'autoanalitzador en el que hem realitzat les proves de glucosa en el laboratori, i no disposem d'altre sistema per a fer-les. Què hem de fer? Perquè?

La sangre heparinizada y dejada a temperatura ambiente muestra una disminución de glucosa plasmática de un 12% en una hora y del 40% a las 4 horas. Por lo que habrá que refrigerar las muestras.

9. Un pacient arriba al laboratori per a fer-se un anàlisi de glucosa, i ens explica que ha esmorzat fa 20 minuts. Què hem de fer?Perquè?

Decirle que vuelva mañana en ayunas, pues se necesitan 8h de ayuno para determinar la glucosa basal y se recomiendan unas 12h para la TTGO.

S le podría hacer la glucosa postpandrial, que se realiza a las 2h de una comida. Generalmente se hace para ajustar la dosis de insulina.

10. Fem una determinació de glucosa amb el mètode de la glucosa oxidasa que te una linealitat de 600 mg/dl. El resultat que obtenim es de 700 mg/dl. Què hem de fer?Perquè?

11. La determinació de glucosa en sang es pot fer a partir de sèrum o a partir de plasma extret amb heparina de liti, quina mostra dona millors resultats?Perquè?

El suero porque no contiene los factores de coagulación.

SUERO:

Glucosa

coágulo + factores de coagulación

H20

Albúmina
proteínas
glucosa

PLASMA:

Glucosa
elementos formes


plasma (contiene los factores de coagulación)

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Tema 1

Glucosa